健康

PCR分析:是什么呢? 如何利用PCR分析

这不是很久以前开发的各种感染性疾病在人类中的诊断可靠,高度敏感和快速的方法。 这种方法被称为“PCR分析”。 这是什么,什么是 它的本质,他能识别微生物,以及如何利用它,我们将在本文中描述。

发现的历史

发明了聚合酶链反应(PCR)是美国科学家凯丽Myullis在1983年最初,专利 诊断的方法 通过“鲸鱼座公司”,在其中他工作和它的创建者。 但在1992年的所有权利和专利权出售给该公司“霍夫曼 - 罗氏”。 在此之后,事实证明,类似的研究,平行进行,并通过其他美国生物学家,如埃利斯·切大卫·埃德加,约翰RRE的报道。 1980年,他从事这一问题,苏联科学家A. Slyusarenko A.卡列金及S·戈罗德茨基。 因此,确定的唯一版权所有者已不可能。 许多杰出的生物化学家到聚合酶反应的方法的发展作出了贡献,欧洲核子研究中心的专利他们的创新。 在PCR的这点分析,在整个专门配备的实验室进行。

发明内容PCR诊断

PCR分析:它是什么,它是如何工作的? 该方法的本质在于以下事实:通过在体外使用一个特殊的酶的DNA聚合酶在特定体积的微生物环境增加。 要做到这一点反复多次使用的DNA材料。 因此,病原体的样品中的存在量将在生化实验室操作的费用增加了,和细菌不会很难在显微镜来检测。

如何为材料的研究?

开展必要的分析:

  • DNA模板;
  • 引物材料连接所述片段的端部;
  • 热稳定酶DNA聚合酶;
  • 化学品,确保酶的适当操作;
  • 缓冲溶液需要创建用于DNA材料的生长和发育的合适的条件。

为了进行PCR操作25-30重复包括三个步骤:变性,退火和延伸。

使用一种特殊的装置分析polimezarnoy链式反应 - 循环仪。 现代化的设备可以安装必要的加热和冷却程序管在诊断期间,以消除误差。

凡申请诊断?

Polimezarnoy链式反应方法在医药各种领域中使用:

  • 法医使用它来识别的遗传物质,例如毛发,唾液或血液;
  • 的血液PCR分析有助于基因分型,例如用于检测个体遗传种植响应于特定药物;
  • 通过人与人之间的方法设置亲情;
  • 最受欢迎的PCR方法已成为医学诊断测定各种感染性疾病的。

什么感染揭示PCR?

因此,医学长期以来一直成功用于PCR分析。 这是什么,我们已经学会了。 而一些病原体可以用它来检测? PCR诊断下列 感染 :

  • 肝炎A,B,C;
  • ureaplasmosis;
  • 念珠菌病;
  • 衣原体;
  • 支原体病;
  • 细菌性阴道炎;
  • 传染性单核细胞;
  • 滴虫病;
  • HPV感染;
  • 结核;
  • 的第一和第二类型的疱疹感染;
  • 幽门螺杆菌感染;
  • 巨细胞病毒;
  • 白喉;
  • 沙门氏菌;
  • HIV感染。

此外,在癌症的诊断中使用的PCR方法。

该方法的优点

诊断PCR有几个优点:

  1. 高灵敏度。 甚至只有少数DNA分子微生物PCR分析确定感染的存在。 它有助于慢性和潜在的疾病发生的方法。 通常在这种情况下,微生物在其他方面未开垦。
  2. 为了调查任何合适的材料,如唾液,血液,性选择,毛发,上皮细胞。 最常见的是验血和泌尿生殖拭子PCR。

  3. 不要求延长生长的培养。 诊断的自动化过程允许4-5小时后,得到的研究结果。
  4. 该方法几乎完全是真实的。 记录的假阴性结果只是个别事件。
  5. 能力,以确定在一个样品材料几种类型的病原体。 这不仅加速了疾病诊断的过程中,也显著降低了材料成本。 通常情况下,医生开的PCR进行综合分析。 价格调查,包括确定的六个病原体,是约1500卢布。

在分析准备的建议

其结果是有效的PCR研究中需要进行测试,以下为诊断的前期准备工作的建议:

  1. 之前,任何口水都要从饮食和药物治疗避免了材料的进气前4小时。 在手术前,立即用清水冲洗白开水漱口。
  2. 上述规则必须采取从脸颊的内部的样品时,可以引导和。 清洗后,建议进行轻柔按摩对皮肤释放的前列腺分泌物。
  3. 尿液通常在家里收集。 要做到这一点,你需要进行生殖器的彻底厕所。 在无菌的塑料容器是必要收集50-60毫升的尿液。 它建议为妇女将棉塞插入阴道内,而男人尽可能地拉扯皮肤褶皱,保证了材料的纯度。 月经期间,你不能拿材料。
  4. 用于递送的精子过程中的材料的收集前的3天,以从性交弃权。 此外,医生建议放弃使用桑拿和热水浴,酒及辛辣食物。 3小时是必要在分析之前从排尿不要。
  5. 要通过泌尿生殖器的涂片,例如,如果一个衣原体PCR分析,男女双方建议性休息3天。 分析前2周不能服用抗生素。 一个星期,你需要停止使用的亲密凝胶剂,软膏剂,栓剂阴道,冲洗。 之前的研究3小时应该从小便避免。 月经期间围栏材料没有进行,点滴结束后只有3天可以采取泌尿生殖器的涂片。

PCR怀孕期间

一个婴儿的等待时间,许多传染病,性病,对于胎儿的正常发育非常危险的。 性传播疾病可以引发宫内发育,流产或早产,先天畸形的孩子。 因此,在孕早期筛查PCR得到它是非常重要的。 通过注册时分析是必要的 - 长达12周。

护栏网材料来自一个特殊的刷子在宫颈管。 该过程是无痛的,不造成危险的婴儿。 通常在怀孕分析衣原体PCR方法,以及ureaplasmosis,支原体病,巨细胞病毒,疱疹病毒,乳头瘤病毒。 所谓PCR 6这样的检查复杂。

PCR艾滋病毒的诊断

由于这样的事实:聚合酶链式反应的方法是在身体的变化和诊断的条件很敏感,许多因素会影响结果。 对于HIV感染因此PCR分析是一种可靠的方法,其效率 - 96-98%。 测试的剩余2-4%给出假阳性结果。

但是,在没有艾滋病毒的PCR诊断某些情况下无法做到的。 通常情况下,它被带到人与假阴性ELISA。 这些数字表明,人还未发展中的病毒抗体,也不会增加多的数量不能被检测到。 这可以通过分析血液PCR方法进行。

此外,还需要为孩子的诊断生命的第一年,出生HIV阳性的母亲。 该方法是唯一的方法可靠地确定状态的孩子。

PCR用于肝炎的诊断

聚合酶链反应方法允许形成抗体与感染或症状发作之前以及肝炎A,B,C,的病毒DNA的检测。 特别有效的是丙型肝炎的PCR分析,因为这种疾病的85%是无症状的和不及时治疗变成慢性。

病原体的及时发现将有助于避免并发症和长期治疗。

综合PCR筛选

综合分析PCR: 是什么呢? 这种 调查方法polimezarnoy连锁反应,其中包括定义的几种类型的感染:生殖支原体,人型支原体,阴道加德纳菌,念珠菌,滴虫,巨细胞病毒, ureaplasmas urealitikum, 疱疹1型和2,淋病,人乳头状瘤病毒。 这个诊断的价格范围从2000到3500卢布。 根据不同的诊所,材料和设备,以及该类型的分析:定性或定量。 需要你的情况是什么 - 医生决定。 在某些情况下,你只需简单地检测其他诸如HIV,通过定量滴度发挥的重要作用的病原体的存在。 在上述所有的病原体调查诊断称为“PCR-12的分析”。

解读分析结果

转录PCR分析是直接的。 只有2个指数量表 - “正面”和“负面”。 一旦检测到病原医生一定要确认这种疾病的存在,并开始治疗病人的99%。 在检测到的细菌的对应列索引号确定感染的定量方法将被指定。 只有医生能确定程度的疾病,并规定必要的治疗。

在一些情况下,例如在确定HIV感染通过PCR,用否定的结果,有必要进行额外的调查,以确认这些数字。

哪里可以得到测试?

凡通过-PCR分析,在公共诊所或私人实验室? 不幸的是,在市级医疗机构的设备和方法往往是过时的。 因此,最好优先考虑拥有现代化的设备和高素质的人员私人实验室。 此外,在一家私人诊所,你得到的结果要快得多。

在莫斯科,许多私人实验室提供各种感染PCR分析。 例如,在这样的诊所“生活”,“综合诊所”,“快乐家族”,“泌尿临”,进行PCR分析。 调查的价格是200个卢布。 用于确定病原体。

由此可以得出结论,传染病通过PCR在大多数情况下,诊断是在感染的早期阶段检测在体内的病原体的快速和可靠的方式。 然而,在某些情况下,选择诊断的其他方法。 确定需要这样的学习只能是一个专家。 PCR分析解密也需要一个专业的方法。 按照医生的建议,不要给他们自己的测试,这是没有必要的。

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