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Ksantoproteinovaya反应蛋白:标志和式方程
为了建立用于ksantoproteinovaya反应的蛋白质许多食物的定性组成。 芳香族氨基酸的混合物中的存在将在阳性测试样品的颜色变化。
什么是蛋白质
它也被称为蛋白,这是一种建筑材料,用于人体。 蛋白质维持肌肉的大小,恢复各器官的损伤和坏死的组织结构,无论是头发,皮肤和韧带。 有了他们的参与,产生红细胞,是由多种激素和免疫系统细胞的正常运作管理。
这是一个复杂的分子,其是具有质量大于6〜10 3道尔顿的多肽。 蛋白结构中形成了大量的偶联的肽键的氨基酸残基。
蛋白质的结构
这些物质与低分子量的肽相比的显着特点是,他们开发的三维空间结构,支持具有不同程度的吸引力的影响。 蛋白质具有四个结构。 对于他们每个人都有自己的特点。
作为衍生的氨基酸序列的分子的主要组织的其识别ksantoproteinovaya反应的蛋白质的基础上,结构。 这种结构是一种周期性重复的肽键-HN-CH-CO-,选择性部分基团为氨基酸的侧链。 他们定义的物质作为一个整体的进一步性质。
初级蛋白质结构被认为是足够的强,这是由于强的共价相互作用的肽键的存在。 后续级别的形成取决于在初始阶段设置的属性发生。
二级结构的形成是可能的,因为在一个螺旋形的氨基酸序列,在其中各圈之间建立氢键的扭转。
分子的三级组织通过应用上,在它们之间的所有可能连接的发生其它片段的螺旋的一个,与氢,二硫化物,共价或离子化合物形成。 其结果是在球的形式的关联。
与它们之间形成化学键的三级结构的空间布置导致了分子或季水平的最终形式的形成。
氨基酸
它们会导致蛋白质的化学性质。 大约有20个主要的氨基酸不同的序列组成的多肽。 在形式羟脯氨酸和羟赖氨酸这也被称为稀有氨基羧酸的基本肽。
作为识别ksantoproteinovaya蛋白反应的标志,某些氨基酸的存在提供试剂的颜色变化,这提示具体结构在它们的组合物中存在。
事实证明,它们是已经发生氢原子的取代在氨基上的羧酸。
分子的示例结构可以用作一个结构式甘氨酸(HNH- HCH- COOH)作为最简单的氨基酸。
在这种情况下,氢CH 2中的一个-可通过较长的碳基包括苯环,氨基,磺基,羧基取代。
什么ksantoproteinovaya反应
对于使用各种技术的蛋白质定性分析。 这些措施包括反应:
- 与紫色的外观缩二脲;
- 茚三酮以形成蓝紫色溶液;
- 甲醛与建立一个红色的;
- Nogier以沉淀灰黑色的颜色。
在执行各方法被证明蛋白质的存在和某些官能团在分子中的存在。
有ksantoproteinovaya的蛋白质反应。 它也被称为击穿穆德。 它指的是用于蛋白质的颜色反应,其中有芳族和杂环氨基酸。
这种样品过程的一个特征是硝化 酸硝酸 特别环状氨基酸残基的硝基的苯环的加入。
这个过程的结果是硝基化合物,沉淀的形成。 这是基本的功能ksantoproteinovaya反应。
什么确定的氨基酸
不是所有的氨基羧酸可以使用这样的样品进行检测。 ksantoproteinovaya蛋白质检测反应的主要特征 - 在分子氨基酸的苯环或杂环的存在。
因为蛋白质是由氨基羧酸两个芳族,其中有一个苯基(苯丙氨酸),和羟基苯基(酪氨酸)分离。
与ksantoproteinovaya反应被确定杂环氨基酸色氨酸,吲哚具有芳核。 在蛋白质中的上述化合物的存在给出了测试环境的特征的颜色变化。
有什么用试剂
为了进行反应ksantoproteinovaya需要准备卵蛋白,或植物来源的1%溶液。
通常使用卵,其被用于从蛋黄蛋白质的进一步分离分割。 对于蛋白质的1%溶液中的纯化水中的十倍量稀释。 所得蛋白质的液体的溶解之后应该通过粗棉布的若干层进行过滤。 该解决方案应存放在阴凉的地方。
它是可以进行用植物蛋白反应。 为了制备溶液,使用小麦粉0.04 kg的量。 0.16升的净化水。 将这些成分,其中在约+ 1℃的温度并列24小时在阴凉处烧瓶中混合 在一天结束时,溶液搅拌,然后过滤其第一用脱脂棉,然后 - 纸折叠过滤器。 所得到的液体存放在阴凉的地方。 该解决方案是主要存在于白蛋白部分。
为了进行反应ksantoproteinovaya作为主要试剂用于硝酸浓 其它试剂是10%的氢氧化钠或氨,明胶溶液和未浓缩的苯酚的溶液。
的方法论
在一个干净的试管在2毫升的量由1%蛋白质溶液个鸡蛋或面粉。 向该絮凝停止加入约9滴浓硝酸。 将得到的混合物加热,得到的黄色沉淀逐渐消失,并且它的颜色变成溶液。
当液体在沿着壁的管冷却下来加入约9滴的 氢氧化钠, 浓缩,这是过剩的过程。 将反应介质变成碱性。 含量变得在试管橙色。
特点
由于ksantoproteinovaya称为硝酸定性反应由蛋白的作用,将样品包含下进行通风橱。 用浓腐蚀性物质时请遵守安全注意事项。
期间必须在一个支架将其固定时,选择的倾斜被认为是加热过程中可能发生的从管内容物的释放。
浓硝酸和烧碱的拨号应该只使用由口玻璃吸管和梨橡胶禁止移液管。
与苯酚反应的相对
为了清楚起见,处理和苯基基团的存在的确认具有相似的样品羟基苯下进行。
管使得稀释苯酚的2毫升,然后沿着壁逐渐,加入2ml浓硝酸。 将溶液进行加热,由此,将其变为黄色。 该反应是在苯环的存在的质量。
过程酚硝化用硝酸,随后在15至35百分比的形成对 - 硝基苯酚和邻硝基苯酚的混合物组成。
用明胶对比测试
为了证明ksantoproteinovaya反应的蛋白质揭示了用芳族结构的氨基酸,可使用不具有酚基的蛋白质。
在一个干净的管由在2 ml的量1%的明胶溶液。 向其中加入约9滴浓硝酸。 将得到的混合物进行加热。 将该溶液在没有黄色,这证明不存在氨基酸与芳族结构着色。 有时是环境的轻微变黄由于蛋白质杂质的存在。
化学方程式
在两步反应运行ksantoproteinovaya蛋白质。 式第一级硝化方法描述了使用浓硝酸氨基酸分子。
一个例子是硝基的附着到酪氨酸,以形成硝基酪氨酸和dinitrotirozina。 在第一种情况下的苯环连接一个NO 2 -基团,并且所述第二化合物具有两个氢原子被NO 2取代。 通过与硝酸反应来表示,以形成硝基酪氨酸分子化学式ksantoproteinovaya酪氨酸反应。
硝化过程中伴随着黄色色调过渡无色着色。 在执行与含有氨基酸的蛋白质该反应残基的溶液的变化苯丙氨酸或色氨酸,和颜色。
第二步是酪氨酸分子的硝化的反应产物尤其是硝基酪氨酸,用铵或氢氧化钠。 其结果是钠盐或铵盐,其中的黄橙色。 这样的反应是与硝基酪氨酸分子的可能性在移动醌形式。 接着盐由其形成NITRONIC酸,其具有的共轭双键的醌系统。
至此结束ksantoproteinovaya反应的蛋白质。 方程式呈现上述第二步骤。
结果
期间包含在三个管的流体的分析中,参考溶液用苯酚稀释。 与苯环的物质给予与硝酸反应定性。 其结果是,它改变了溶液的颜色。
如已知的,明胶包含胶原的水解形式。 该蛋白质不包含氨基酸的芳族结构。 通过与酸反应在该介质中的颜色没有变化。
在第三个试管中有蛋白质ksantoproteinovaya阳性反应。 具有芳族结构的所有蛋白,无论它是在给定溶液的颜色的变化的苯基或吲哚环,:结论可以如下得出。 这是由于形成硝基化合物的具有黄色颜色。
进行显色反应证明各种化学结构的氨基酸和蛋白质的存在。 实施例明胶显示,其组合物包括不具有苯基或环状结构的氨基羧酸。
与ksantoproteinovaya反应可以通过皮肤发黄当施加到其上的强硝酸来解释。 同样的颜色将成为她类似的分析过程中泡沫牛奶。
在临床实验室实践此颜色样本不用于在尿中检测的蛋白质。 这是由于尿液本身的黄色。
Ksantoproteinovaya反应变得越来越多地用于氨基酸如色氨酸和酪氨酸量化,作为各种蛋白质的一部分。
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